микроскопия по граму что это
Бактериоскопическое исследование окрашенного мазка ( по Граму)
Где проводится: Во всех медицинских центрах и лабораториях «Тонус»
Срок выполнения: 1-2 рабочих дня
Бактериоскопия (Бактериоскопическое исследование окрашенного мазка по Граму) – это метод, в основе которого лежит исследование бактерий под микроскопом. Это быстрый метод диагностики, который широко используется врачами разных специальностей при подозрении на наличие бактериального инфекционного процесса.
Важно понимать, что бактериоскопическое исследование окрашенного мазка по Граму является не совсем специфичным методом, и для полноценной идентификации возбудителя, а также, определения его чувствительности к антибиотикам, необходимо проведение бактериального посева.
Бактериоскопия широко используется как в терапии, так и в акушерско-гинекологической практике.
В зависимости от типа, бактерии можно разделить на Грам положительные и Грам отрицательные. Есть ряд бактерий, которые не имеют специфической окраски по Граму. В зависимости от расположения в организме (заселения тех или иных слизистых оболочек и органов), спектр бактерий меняется.
Например, при исследовании гинекологических мазков, нормальной флорой являются грамположительные палочки (лактоморфотипы). При возникновении инфекционного процесса, данный тип бактерий, как правило, угнетается и активизируетс рост условно-патогенной и патогенной микрофлоры. При бактериальном вагинозе, как правило, имеет место коккобацилярная грамвариабельная микрофлоры. При гонорее в мазке будут присутствовать грамотрицательные кокки бобовидной формы, расположенные парами (по типу «кофейных зерен»). При других гнойных заболеваниях (не отличающихся специфичностью клиники и возбудителя), при микроскопии, в зависимости от этиологии, встречаются как грамположитеьные, так и грамотрицательные палочки. Помимо выявления возбудителя, в мазке учитывается наличие клеток эпителия, количество лейкоцитов, присутствие ключевых клеток.
Если в качестве исследуемого материала используется мокрота, то обычно, в ней находят грамположитеьные кокки, морфологически сходные с пневмококками, либо мелкие неодинаковой формы палочки, грамотрицательные кокки.
В мазке из раны чаще всего встречаются грамположительные кокки.
Таким образом, материалом для бактериоскопического исследования могут быть:
Так как бактериоскопическое исследование не позволяет с высокой точностью определить возбудителя, после него необходимо проведение бактериологического посева содержимого на флору.
Бактериоскопическое исследование окрашенного мазка по Граму позволяет врачу быстро сориентироваться в большом количестве возможных возбудителей и выбрать антибактериальный препарат для стартовой терапии, обладающий таким спектром, чтобы воздействовать на определнную группу бактерий, так как посев на флору требует нескольких дней для получения результата, а начать лечение необходимо непосредственно по факту обращения пациента за помощью.
Условия подготовки к проведению бактериоскопического исследования окрашенного мазка по Граму определяется лечащим врачом и обусловлено тем, в какой области будет производиться забор биологического материала.
Важно проводить исследование до начала антибактериальной терапии.
Показанием к проведению бактериоскопического исследования окрашенного мазка по Граму является наличие инфекционно-воспалительного процесса различной локализации (мочеполовой системы, легких и дыхательных путей, ЛОР-органов, глаз, слизистых оболочек любой локализации, раневых поверхностей и т.д.).
Основной целью данного исследования является выявление бактерий.
По результатам исследования выдается заключение, в котором отражено: наличие или отсутствие бактерий, тип бактерий (грамположительные, грамотрицательные и т.д.), оценка лейкоцитарной реакции (количество лейкоцитов), количественная оценка микрофлоры, другие возможные клеточные изменения.
Микроскопическое исследование нативного мазка с окраской по Граму в Москве
Микроскопию мазка с окраской по Граму проводят при исследовании различных биологических материалов. Анализ относится к бактериоскопическим методам и применяется для диагностики бактериальных инфекций различных органов.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Микроскопическое исследование нативного мазка с окраской по Граму?
Подробное описание исследования
Микроскопическое исследование нативного, то есть взятого непосредственно из органа, материала представляет собой один из методов диагностики различных бактериальных инфекций. Для исследования подходит различный биоматериал (например, собранный из зева, раны, носа и пр.). Анализ также называется «бактериоскопический». При его выполнении используется световая микроскопия, благодаря которой специалист оценивает состав биоматерила из различных локализаций.
Большинство бактерий условно делятся на Грам-положительные и Грам-отрицательные. Первые окрашиваются в фиолетовый (синий) цвет, а вторые — в красный (розовый) цвет. Такое разделение обеспечивается за счет клеточной стенки бактерий и её способности накапливать различные красители.
Бактерии — одна из наиболее древних форм жизни на нашей планете, которая представляет собой многочисленную и разнообразную группу. В процессе эволюции часть микроорганизмов, переходя на симбиотические — взаимовыгодные для людей и микробов — взаимоотношения, адаптировалась к существованию в человеческом теле. Совокупность микробных сообществ, разнообразных по своей численности и видовому составу, в различных локализациях тела человека определяет нормальный микробиоценоз нашего организма.
Наше тело заселено колоссальным числом микроорганизмов: бактериями, грибами, вирусами и археями. Они обеспечивают защиту организма от инфекционных заболеваний, участвуют в переваривании пищи и выполняют много других важных функций. Заселение микробов в организм человека происходит с его появлением на свет. Однако состав микрофлоры разных органов не является строго постоянным и может меняться в зависимости от ряда факторов, к которым, например, могут относиться использование антибиотиков, инфекционные заболевания или гормональный дисбаланс.
Микроскопию мазка с окраской по Граму проводят при исследовании различных биологических материалов. Это позволяет ориентировочно судить о составе микрофлоры, ее количественном содержании и наличии патогенных микроорганизмов. Данный метод в ряде случаев помогает выявить микробы, плохо растущие на обычных питательных средах (при выявлении с помощью культурального метода).
Исследование применяется в качестве дополнения к посеву биологического материала при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний различных органов и тканей. Например, исследование материала из уха может потребоваться при воспалительных заболеваниях органа слуха — отитах. Они могут вызываться различными микроорганизмами, в том числе и грибами.
Исследование материала из глаза производится при диагностике различных конъюнктивитов. Микроскопия отделяемого из раны — при её нагноении, из молочных желез — для уточнения происхождения маститов и т.д.
Таким образом, микроскопия нативного мазка с окраской по Граму представляет собой один из базовых лабораторных методов диагностики инфекционных процессов в разных органах. Анализ доступен по цене и широко применяется в клинической практике.
Микроскопическое исследование мазка из влагалища с окраской по Граму (с оценкой по шкале Ньюджента)
Биоматериал
Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:
Подготовка к исследованию
Мазки не следует брать:
Метод исследования
Бактериоскопия окрашенного по Граму мазка из влагалища – это «золотой стандарт» диагностики бактериального вагиноза. Диагностика бактериального вагиноза основывается на наличии или отсутствии следующих признаков:
Для оценки результатов исследования препаратов, полученных из отделяемого влагалища и окрашенных по Граму, используется стандартная десятибалльная шкала (критерии Ньюджента). В основе лежит система баллов (очков) от 0 до 4 и их комбинация для диагностики и оценки степени бактериального вагиноза по оценке трех бактериальных морфологических типов (морфотипов) влагалища:
Мазок из влагалища окрашивают по Граму и считают отдельно количество выявленных морфотипов под иммерсионной системой микроскопа в поле зрения:
Количество полученных баллов суммируют (A+B+C)
Микроскопическое исследование мазка из цервикального канала и отделяемого из влагалища является необходимым методом в скрининге и диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний женских половых путей (цервицит, вагинит), поскольку позволяет оценить степень воспалительного процесса (лейкоцитарную реакцию) и состояние микрофлоры, а также выявить элементы грибов рода Candida, трихомонады, внутриклеточные грам-отрицательные диплококки.
Показания к исследованию:
Референсные значения (вариант нормы).
Пример результата исследования:
| Параметр | Референсные значения |
|---|---|
| Микроскопия мазка из влагалища | |
| Клетки плоского эпителия (влагалище), в п/зр | |
| Соотношение лейкоцитов к клеткам плоского эпителия (влагалище) | 30 (4) |
| Грамвариабельные коккобациллы (влагалище), в п/зр (балл по Ньюдженту) | 5 — 30 (3) |
| Грамвариабельные изогнутые палочки (влагалище), в п/зр (балл по Ньюдженту) | Не обнаружены (0) |
| Сумма баллов по шкале Ньюджента | |
Интерпретация результатов по шкале Ньюджента:
Сдать анализ на микроскопическое исследование мазка из цервикального канала и влагалища
| Исследуемый биоматериал | Мазок |
| Метод исследования | световая микроскопия |
| Cрок исполнения с момента поступления биоматериала в лабораторию | 2 к.д. |
Описание
Данное исследование используется для оценки состояния микрофлоры, а именно помогает исключить бактериальный вагиноз, изменение кислотности среды, ее защелачивание.
В частности, такое исследование используют для определения количества полезной и условно-патогенной флоры, а также для выявления ключевых клеток.
Нормальная микрофлора влагалища и цервикального канала представлена лактобактериями и условно-патогенными микроорганизмами. Лактобактерии выполняют защитную функцию, создавая слабокислую среду в присутствии гликогена, что не допускает излишнего размножения условно-патогенных бактерий. Они же в свою очередь находятся в незначительном количестве, которое может повышаться на фоне снижения иммунитета, уменьшения концентрации лактобактерий, что приводит к развитию вагиноза. В частности, преобладающими микроорганизмами при вагинозе являются гарднерелла, мобилинкус. Учитывая последние данные о существовании особенных биопленок в биоценозе половых путей, данные бактерии обычно связаны и с другими условно-патогенными микроорганизмами.
Полученный материал из влагалища и цервикального канала в данном исследовании наносят на предметные стекла. В присутствии специальных красителей, после нагревания и фиксации спиртом, оценивают количество фиолетовых и розовых частиц. Лактобактерии выглядят как длинные большие палочки фиолетового цвета, так как являются грамположительными. Условно-патогенная флора, а именно гарднерелла и бактериоиды, а также мобилинкус, представляют собой мелкие кокки и палочки розового цвета, так как являются грамотрицательными.
Дополнительно происходит оценка наличия ключевых клеток. Данные образования являются маркерами вагиноза, так как представляют собой клетки эпителия с расположенными на них гарднереллами. Таким образом форма клетки меняется, поверхность ее становится шероховатой и обращает на себя внимание при проведении исследования.
Оценка по шкале Ньюджента предполагает подсчет баллов, которые начисляются за каждый из критериев:
Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка, окрашенного по Граму
Нормальной флорой при исследовании гинекологических мазков являются грамположительные палочки, которые в результате описываются как лактоморфотипы. При бактериальном вагинозе микробная флора представлена обильной мелкой коккобациллярной грамвариабельной флорой и характеризуется снижением лактоморфотипов. При гонорее в мазке присутствуют грамотрицательные кокки бобовидной формы, расположенные парами внутри и внеклеточно. При других гнойно-воспалительных состояниях (неспецифических) могут встречаться грамположительные кокки, грамотрицательные палочки. В мазках учитываются также наличие эпителия, присутствие ключевых клеток и количество лейкоцитов.
В мокроте имеют значение грамположительные кокки, слегка вытянутые, в капсуле, расположенные парами, морфологически сходные с пневмококками, или мелкие неодинаковой формы грамотрицательные палочки, сходные с гемофилами, а также грамотрицательные кокки, расположенные поодиночке, что может говорить в пользу наличия бранхамелл.
В мазках из ран чаще всего встречаются грамположительные кокки.
Однако с помощью микроскопического исследования нет возможности дать заключение о названии бактерий. Для определения рода и вида бактерий требуется проведение бактериологического посева.
мочеполовых путей;
лёгких;
ЛОР-органов;
глаз (при подозрении на гонококковую инфекцию);
кожи, мягких тканей и др.;
обследование женщин при беременности и по показаниям при профилактических осмотрах; при диагностике бактериального вагиноза;
дополнительное исследование к посевам на анаэробную инфекцию.
Условия подготовки определяются лечащим врачом.
Инструкция по сбору мокроты:
1. Выделившуюся мокроту собрать в стерильный контейнер с красной крышкой.
2. Крышку плотно закрыть, чтобы биоматериал не вытек.
3. Если мокрота отделяется плохо, накануне можно принять отхаркивающие
средства (по согласованию с врачом!).
Правила забора клинического материала из урогенитального тракта
У женщин при исследовании материалов из урогенитального тракта взятие образцов желательно проводить приблизительно в середине менструального цикла (если заболевание не имеет явных проявлений) или в дни, когда нет кровянистых выделений при обострении процесса); у мужчин при исследовании материалов взятие образцов из уретры необходимо проводить при условии задержки мочеиспускания не менее 3-4 часов; если нет возможности придерживаться упомянутых условий, то следует помнить, что это может повлиять на качество мазков и исказить интерпретацию результатов микроскопии. Всегда необходимо учитывать, что проведение системной терапии, особенно антибактериальными препаратами, может значительно повлиять на результат микроскопического исследования и снизить его диагностическую ценность. Перед взятием образца важно понимать, какой материал должен быть взят, и что предполагается обнаружить. Обычно во время обследования пациента необходимо брать несколько клинических образцов (не только для микроскопии, но также и для других лабораторных исследований). Важно помнить, что: Материал из уретры для микроскопического исследования берется раньше всех других уретральных образцов сразу же после взятия выделений или проб для культурального исследования на гонококки.
Если имеются обильные выделения и подозревается трихомонадная или кандидозная инфекция, образец берется из заднего свода, где концентрация предполагаемого инфекционного агента наибольшая. Если количество выделений обычное, образец следует брать с боковой стенки влагалища. Этот клинический материал даст наиболее надежную информацию о состоянии влагалища в данный момент. Образец из шейки матки для микроскопического исследования берется раньше всех других цервикальных образцов или сразу же после взятия мазка для культурального исследования на гонококки. Мазок наносится на предметное стекло тонким слоем. Если количество материала небольшое, или Вы хотите поместить на одно стекло несколько образцов материала из разных локализаций у одного пациента, материал должен наноситься ближе центру стекла в заранее обозначенных областях.
Все мазки, приготовленные для направления в лабораторию, должны быть высушены на воздухе, промаркированы и, при необходимости, зафиксированы.
Правила забора клинического материала у мужчин для микроскопического исследования
Правила забора клинического материала у женщин для микроскопического исследования
Образец из уретры для окрашивания по Граму или метиленовым синим берется с помощью бактериологической петли объемом 1 мкл. При наличии большого количества выделений наружное отверстие должно быть очищено с помощью марлевого тампона. При отсутствии свободных выделений может быть проведен легкий массаж уретры, выполняемый врачом. После введения пластиковой петли в уретру на 1-2 см необходимо плоскость «глазка» петли двигать к отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковые стенки уретры. Не рекомендуется вращать петлю во время процедуры взятия образца. Для пациентки это болезненно. После получения клинического материала петля накладывается на поверхность стекла и передвигается по нему несколько раз с легким нажатием. Петля должна оставить на стекле тонкую полоску клинического материала. Образец из цервикального канала для приготовления окрашенных препаратов берется в зеркалах ватным/дакроновым тампоном, специальной щеточкой или ложечкой. Необходимо тщательно очистить наружное отверстие цервикального канала при помощи большого марлевого тампона от вагинальных выделений для предотвращения возможной контаминации. После введения тампона в шеечный канал на 1-2 см его вращают несколько раз. Клинический материал должен быть перенесен с тампона на стекло как можно более тонким слоем. Для микроскопического исследования окрашенных вагинальных мазков материал берется в зеркалах с заднего или боковых сводов бактериологической петлей 10 мкл и тонким слоем распределяется на предметном стекле.